임상병리사를 위한 일반 미생물학 실습(3판)



머리말

본 실험서가 출간되기까지 지혜를 주시고 함께하신 하나님께 감사와 영광을 드립니다.

본서가 1992년 처음 출간된 지 어느덧 25년의 세월이 흘렀습니다. 그동안 본서를 사랑해주시고

본서의 3차 개정에 이르기까지 많은 조언과 고견을 보내주신 동학제현들에게 진심어린 감사의 마

음을 전합니다.

현대의 미생물학은 순수미생물학은 물론 병원미생물학을 포함하여 분자생물학, 유전공학, 환경

미생물학, 농학, 약학, 식품미생물학, 면역학 등 거의 모든 자연과학 분야에 광범위한 영역을 차

지하고 있으며 하루가 다르게 발전하고 있습니다.

모든 미생물학 연구 분야에서 가장 기초적인 실험과정인 일반미생물학 실험을 정확하게 숙련하

기란 결코 쉬운 일이 아니기 때문에 어떻게 하면 교수님들이 학생들에게 좀 더 쉽게 이해하고 도

움이 되는 실습서가 될까를 생각하면서 오랜 기간 동안 실험과 학생지도를 통해 얻은 노하우와 자

료를 모아서 본서를 개정하게 되었습니다.

본 개정판의 특징은 가능한 사진과 삽화를 많이 사용하고 필요한 부분에 색조를 넣어 실험의

이해를 도왔습니다. 또한 실험 각 장마다 그 장에서 학습한 내용을 복습하고 정리하도록 문제와

work sheet란을 마련하여 학생 각자가 실험 중 느낀 견해와 특기사항과 주의사항을 기록하도록 하

였습니다.

1장에서 6장까지는 일반미생물학 전체 미생물학 분야 및 병원미생물학의 공통 기초 분야를 다

뤘으며, 7~8장에서는 식품미생물학 및 환경미생물학, 위생학 분야에서 응용할 수 있도록 하였고,

9장에서는 미생물학 실험의 정확성을 기하기 위해 미생물실험실 정도관리 분야를 언급하였으며,

부록에서는 미생물실험실에서 많이 사용하는 염색시약과 배지, 각종 지시약과 pH 범위를 정리하

여 실험 중 언제라도 쉽게 참고하고 지도할 수 있도록 하였습니다.

언제나 그렇듯이 탈고하고 나면 아쉽고 부족하고 부끄러운 부분이 많아 송구스럽기까지 합니다.

그러나 제한된 지면에 최선을 다한 것으로 자위해 봅니다. 미흡한 부분은 차후 개정하면서 보충

할 것을 약속하며 동학제현들의 많은 지적과 고견을 기대합니다.

본서의 출판을 맡아주신 고려의학 김영환 사장님과 편집부 직원들의 노고에 감사드립니다.

2023년 8월

한국임상미생물학 교수회 편찬위원회

제1장 • 미생물학 실험의 기초 Basic of Microbiology Laboratory__1

1. 미생물 실험 준비물 1

2. 미생물 실습 시 주의사항 2

3. 미생물학 실험의 기본 조작 3

4. 멸균 8

5. 실험실 안전장치 20

실습 1과 실험보고서 26



제2장 • 현미경의 구조와 사용법 Instruction and Structure of Microscope__29

1. 개요 29

2. 광학 현미경의 기본구조 34

3. 현미경 사용법 38

실습 2-1과 실험보고서 42

실습 2-2과 미생물의 현미경적 크기 측정(Microscopic measurement) 43

실습 2-2과 실험보고서 48



제3장 • 미생물의 염색 Staining of Bacteria__51

1. 미생물 염색의 원리 52

2. 염료(dye)의 분류와 종류 54

3. 염색의 종류 54

4. 염색시약의 제조 55

5. 염색결과에 영향을 미치는 요인 56

실습 3-1과 도말표본 제작법 57

실습 3-1과 실험보고서 62

실습 3-2과 단순염색(Simple Staining) 64

실습 3-2과 실험보고서 68

실습 3-3과 습윤 표본 제작법(Wet mount preparation) 70

실습 3-3과 실험보고서 73

실습 3-4과 그람 염색(Gram Staining) 75

실습 3-4과 실험보고서 85

실습 3-5과 항산성 염색(Staining method for Acid-Fast Bacilli) 90

실습 3-5ㅁA과 실험보고서 95

실습 3-5B과 실험보고서 98

실습 3-6과 음화 염색(Negative staining) 101

실습 3-6과 실험보고서 106

실습 3-7과 협막 염색(Capsule staining) 108

실습 3-7과 실험보고서 114

실습 3-8과 아포 염색(Spore staining) 116

실습 3-8과 실험보고서 120

실습 3-9과 현적 표본 제작법(Preparation of Hanging drop Slide) 122

실습 3-9과 실험보고서 126

실습 3-10과 편모 염색(Flagella staining) 128

실습 3-10과 실험보고서 133

실습 3-11과 이염소체 염색법(Metachromatic granule staining) 135

실습 3-11A과 실험보고서 140



제4장 • 미생물의 배양 Culture of Bacteria__143

1. 배지(Medium, Media) 143

2. 배지의 제조 147

실습 4-1과 영양우무배지의 제조(Preparation of nutrient media) 150

실습 4-1과 실험보고서 156

실습 4-2과 혈액우무배지의 제조(Preparation of blood agar plate) 158

실습 4-2과 실험보고서 164

실습 4-3과 초콜릿 우무배지의 제조(Preparation of chocolate media) 166

실습 4-3과 실험보고서 171

3. 세균의 접종법 및 분리배양 173

실습 4-4과 사면배지 및 액체배지 접종법 173

실습 4-4A과 실험보고서 179

실습 4-4B과 실험보고서 180

실습 4-5과 평판배지 분리배양 182

실습 4-5과 실험보고서 189

실습 4-6과 혈액우무배지 분리배양 190

실습 4-6과 실험보고서 193

4. 배양 방법(culture method) 195

실습 4-7과 각종 배양기 배양 195

실습 4-7과 실험보고서 206



제5장 • 미생물의 생화학적 검사 Biochemical Tests of Bacteria__207

실습 5-1과 Indole 생성능 시험(Indole production test) 208

실습 5-1과 실험보고서 210

실습 5-2과 Methyl red test 212

실습 5-2과 실험보고서 214

실습 5-3과 Voges-Proskauer test 215

실습 5-3과 실험보고서 218

실습 5-4과 Citrate 이용능시험 220

실습 5-4과 실험보고서 223



제6장 • 항균제 감수성 시험 Antimicrobial Susceptibility Test__225

실습 6과 디스크 확산법(Disk Diffusion Method) 225

실습 6과 실험보고서 238



제7장 • 세균의 수질검사 Water Quality Examination of Bacteria__241

실습 7-1과 복식시험관 발효법(Multiple Tube Fermentation Method) 242

실습 7-1과 실험보고서 247

실습 7-2과 막 여과법(Membrane Filtration Method) 250

실습 7-2과 실험보고서 253

실습 7-3과 효소기질 이용법(Enzyme Substrate Method) 255

실습 7-3과 실험보고서 257



제8장 • 감염관리 감시배양 검사 Microbiological Methods for Surveillance System__259

실습 8-1과 공기배양검사(부유세균검사) (Volumetric air test) 260

실습 8-1과 실험보고서 269

실습 8-2과 공기배양검사(낙하세균검사) (Settle plate test) 271

실습 8-2과 실험보고서 273

실습 8-3과 표면식중독균 검사(Food poisoning test) 275

실습 8-3과 실험보고서 278

실습 8-4과 내독소(endotoxin) 검사, Limulus Amebocyte Lysate Test 280

실습 8-5과 냉각탑용수 검사 282

실습 8-6과 멸균 확인 검사(중앙공급실 등) 287

검체의 채취 및 취급요령 291



제9장 • 미생물실험의 정도관리 Quality Control in Microbiology Laboratory__295

1. 검사수행지침 296

2. 미생물 검사기구의 점검 296

3. 배지  ·  시약 및 공급물품의 점검 297

실습 9과 실험보고서 301



부록 Appendix__303

I. 염색시약  303

II. 배지(Culture media) 307

III. 지시약과 pH 범위 338



참고문헌 347